脂肪酸诱导鹅肝细胞脂肪变性相关差异表达基因的筛选
王继文 教授
为研究鹅肝细胞脂肪变性过程中脂质代谢的变化，以四川白鹅原代肝细胞为研究对象，用不同浓度、不同比例的油酸和棕榈酸体外诱导鹅肝细胞脂肪变性，选择细胞内TG沉积多且细胞活性变化小的处理组与未添加脂肪酸的对照组进行比较，构建抑制消减杂交文库，筛选鹅肝脂肪变性过程中表达上调和下降的差异基因。
结果显示：油酸:棕榈酸为2:1时细胞内TG沉积达到最大，且脂肪酸对细胞活性影响最小。利用抑制消减杂交技术构建文库，筛选得到108条EST，其中87条在NCBI中有报道，21条为新的EST。通过基因功能分类发现了鹅中大量与代谢通路相关的基因，并用实时定量技术对它们进行了验证。结果表明，涉及到脂肪酸从头合成与VLDL分泌通路的基因在脂肪酸诱导的变性细胞中表达下降，而脂肪酸氧化与脂质沉积相关的基因表达上调。该研究成功构建了利用油酸和棕榈酸的混合物诱导鹅肝细胞脂肪变性的细胞模型，并成功筛选大量与脂质代谢平衡相关的基因，为进一步深入研究鹅肝脂肪变性的分子机制奠定了坚实基础。
