鹅IL-6基因的克隆、表达、调控分析
白介素6(interleukin-6,IL-6)是一类具有多功能的细胞因子,在免疫反应中发挥重要作用。试验采用RT-PCR的方法扩增出鹅IL-6基因;用荧光定量PCR方法检测鹅IL-6基因在各组织中的表达分布情况;用LPS和油酸(oleic acid)处理鹅前脂肪细胞,并检测LPS/oleic acid对IL-6基因的表达调控情况;在鹅前脂肪细胞中,用小干扰RNA抑制LEPR基因的蛋白表达,检测IL-6基因在干扰细胞和对照细胞中的表达差异。
试验最终获得了鹅IL-6基因的全长编码区序列(CDS),编码234个氨基酸残基的多肽,拥有4个保守的α螺旋和IL-6家族的共有结构域,鹅IL-6基因与鸡IL-6在氨基酸序列上有74%的同源性,与人的只有39%的同源性;荧光定量PCR显示,鹅IL-6基因主要表达于肝脏中,在体外,LPS和oleic acid可以上调IL-6的表达;将脂肪细胞中的LEPR干扰后,减少了IL-6对LPS/oleic acid的敏感性,但是却提高了脂联素的表达水平,鉴于脂联素是一类免疫抑制蛋白,LEPR在免疫方面的功能很可能跟脂联素的作用相关。


