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鸭瘟病毒UL26.5基因的分子特征和编码蛋白的亚细胞定位研究

热度2票  浏览10次 【共0条评论】【我要评论 时间:2010年3月09日 10:32

程安春 教授中国水禽网'{2t.f.h!J9^h(N g

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鸭瘟病毒DPVUL26.5基因具有疱疹病毒支架蛋白的典型特征,含6个保守的结构功能域和1个丝氨酸蛋白酶水解位点(M位点),且具有与其功能相关的磷酸化位点;编码的多肽链中亲水区域大于疏水区域,是一种膜外蛋白。UL26.5基因与α-亚科禽类疱疹病毒属的进化关系最近。中国水禽网Z'L$^ O'h

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设计引物对UL26.5基因进行PCR扩增后将产物亚克隆至pET32a+)原核表达载体,获得表达质粒pET32a-UL26.5,转化至E. coli BL21DE3)进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测显示表达的蛋白分子质量约59 ku,与预期大小一致。重组蛋白纯化后制备兔抗血清,间接ELISA效价为1:204 800。通过免疫荧光技术进行DPV UL26.5基因表达蛋白的亚细胞定位检测,结果显示最早可在感染后10 h的细胞核中检测到特异性荧光,12 h后越来越多的细胞核中出现绿色荧光,到48 h细胞质中也出现少量荧光,研究结果为进一步开展DPV UL26.5基因功能的研究提供了重要数据和材料。

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摘自《国家水禽产业技术体系工作简报》

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TAG: 病毒 鸭瘟 亚细胞
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