用FQ-PCR检测活体肠炎沙门氏菌的研究
程安春 教授
本试验设计合成了1对能特异性扩增130 bp DNA片段的引物及相应的TaqMan探针，首次建立了肠炎沙门氏菌（SE）物种特异性的FQ-PCR方法。该方法只能特异性扩增SE，而对猪霍乱沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、鸭沙门氏菌、鸡沙门氏菌、都柏林沙门氏菌、鸭疫里默氏杆菌、禽多杀性巴氏杆菌、鸭源大肠杆菌等常见沙门氏菌和常见感染鸭的致病菌的扩增结果均为阴性。该法检测SE比普通PCR具有更高的灵敏度（检测SE标准DNA模板的灵敏度为4 copies/µL，检测SE细菌数的敏感性为6 CFU/µL）。
分别应用该技术和传统细菌分离法检测人工感染死亡雏鸭的心、肝、脑和直肠粪便，结果显示，2种方法对心、肝、直肠粪便的阳性检测结果符合率为100%，而FQ-PCR对脑的阳性检测率极显著（P<0.01）高于细菌分离。
结果表明：该方法快速、灵敏、特异、重复性好且能实时定量检测，可用于SE分离物的鉴定、SE感染疑似病例检测、SE在感染动物体内动态分布规律研究、SE感染的分子流行病学调查。
